Выделение и характеристика бактерий-деструкторов для биоремедиации нефтезагрязненного побережья Черного моря

Береснев К.К., Рубан К.Р., Азаров И.В., Митина Е.Р., Матвеев А.В.

1

Актуальность исследования

• Мазут крайне токсичен для экосистемы и способен оставаться в ней годами.
• Традиционные методы очистки не всегда эффективны при загрязнении мазутом и для очистки применяют методы биоремедиации аборигенными штаммами.

2

Место забора проб

Побережье с наибольшим загрязнением

Побережье с наименьшим загрязнением

Выделение бактерий из проб

• Для выделения бактерий, пробы высеяли на богатую среду VYT, инкубацию проводили при 28°С, 4 суток.
• Среда VYT на 1 литр воды:

16 г соевого пептона,

10 г дрожжевого экстракта,

5 г хлорида натрия

15 г агара.

3

Культивирование на селективной среде

• Колонии с богатой среды пересеяли на минеральную среду DSMZ 125 с добавлением 0,5% нефти, инкубацию проводили при 28°С, 4 суток.

4

Выделение чистых культур

• После 5-8 пересевов на минеральной среде были выделены чистые культуры.
• Удалось выделить чистые культуры А, D.

5

Микроскопия

• Культура A – грамотрицательная палочка, культура D - грамположительная палочка.
• Микрофотографии культур сделаны при окрашивании по Граму и при увеличении х1000

6

Генотипирование

• Для генотипирования культур провели анализ 16-S рРНК

7

A

D

Выводы

На основании анализа последовательности гена 16S рРНК культура A была идентифицирована как Sphingopyxis terrae, а культура D – как Rhodococcus erythropolis. Фенотипические признаки подтверждают генотипическую идентификацию. Выделенные аборигенные штаммы обладают высоким потенциалом для создания биопрепаратов для очистки нефтезагрязненных пляжей.

8