Н.В. Сорокин, В.К. Шорманов, Е.А. Коваленко
ФГБОУ ВО «Курский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации, Курск, Российская Федерация
ХИМИКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ МЕТОМИЛА
ВВЕДЕНИЕ. Метомил, (E,Z)-метил N-{[(метиламино)карбонил]окси}-этанимидотиоат, – широко используемый в сельском хозяйстве карбаматный пестицид, который позиционируется как отравляющий агент во многих смертельных случаях, связанных с производственными, случайными, преднамеренными отравлениями. В России на данный момент отсутствует нормативная документация, регламентирующая определение метомила в биообъектах, поэтому остаются актуальными вопросы химико-токсикологических исследований данного вещества.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ. Оптимальный извлекающий агент для метомила (0,1% в гомогенате печени) выбирали среди 10 растворителей. Для этого проводили двукратную (каждый этап по 30 минут) инфузию (растворитель : печень = 50 : 25) с последующей очисткой и идентификацией методом ТСХ (пластины Sorbfil, силикагель СТХ-1А) и УФ-спектрофотометрии (прибор СФ-2000). Удаление балластных веществ проводили сорбцией на силикагеле (60Å, 0,05±0,01 мм) с фракционированием элюата. Анализ метомила осуществляли с помощью ВЭЖХ (прибор Waters Alliance 2695 с диодной матрицей) для высокой чувствительности и селективности.
РЕЗУЛЬТАТЫ. Метилбензол эффективен для извлечения метомила из биоматериала (выход >63%), достаточно двух 30-минутных инфузий (метилбензол : биоматериал = 2 : 1). Оптимальная элюирующая смесь для ТСХ – гексан : диметилкетон (12 : 8) (Rf 0,46±0,02, Rs 0,64±0,03, внутренний стандарт – карбофуран). Для ВЭЖХ выбраны условия: колонка Nova Pack (силикагель С-18, 5 мкм, 1,5×0,39 см), подвижная фаза – вода : гидроксиметан : этаннитрил (35 : 2,5 : 12,5), скорость 60 мл/час, λ максимальная = 240 нм (относительное удерживание = 0,24 (внутренний стандарт – карбофуран), число теоретических тарелок = 4092, асимметрия = 1,24). Линейная зависимость площади пика от концентрации метомила описана уравнением регрессии S = 1445,64 ∙ C - 4,209.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ. Серии исследований, проведенные с использованием модельных гомогенизированных смесей метомила с биоматрицей (паренхимой печени), позволили разработать методику химико-токсикологического анализа. Данная методика обеспечивает качественную оценку и количественное определение аналита в биоматрице в диапазоне 63-64,5 % при его концентрации 0,5∙10-5-0,25∙10-1 г / 25 г; демонстрирует наименьшие обнаруживаемые и определяемые в биоматрице количества метомила установленные на уровне 0,6∙10-5 и 1,05∙10-5 г / 25 г. Предлагаемая методика была подвергнута валидационным испытаниям, принятыми в сфере судебно-химического анализа по критериям линейности, точности, селективности и стабильности.