1 of 9

DNA Extraction Techniques

ผู้นำเสนอ : นายปัถย์ หมีอินทร์

ที่ปรึกษา : นายชัยณรงค์ กุลฉิม

2 of 9

Outline

การสกัดกรดนิวคลีอิกให้บริสุทธิ์ด้วยแม่เหล็ก

Magnetic nucleic acid purification

การสกัด DNA หรือ RNA ด้วยแม่เหล็กให้มีความบริสุทธิ์ นั้นขึ้นอยู่กับคุณสมบัติของอนุภาคซุปเปอร์พาราแมกเนติกในระดับไมโครหรือนาโน อนุภาคเหล่านี้มักจะสังเคราะห์จาก iron oxide กับสารแม่เหล็ก (Fe3O4) โดยซุปเปอร์พาราแมกเนติกนั้น จะยังไม่มีแรงแม่เหล็กจนกว่าจะถูกกระตุ้นด้วยสนามแม่เหล็ก ดังนั้นถ้าสนามแม่เหล็กเป็นศูนย์ อนุภาคก็จะไม่มีแรงดึงดูด แต่ถ้ามีสนามแม่เหล็กจึงจะมีคุณสมบัติเป็นแม่เหล็ก

ประสิทธิภาพของอนุภาคเหล็กออกไซด์ ในการจับกับ DNA หรือ RNA นั้น ขึ้นอยู่กับการเคลือบด้วยหมู่เคมีที่พื้นผิว นอกจากนี้การเคลือบยังช่วยเพิ่มการดูดซับของกรดนิวคลีอิกให้กับพื้นผิวของอนุภาคแม่เหล็ก การทำหน้าที่ของโมเลกุลที่มาเชื่อมต่อนี้ ทำให้อนุภาคเหล็กออกไซด์สามารถดูดซับกรดนิวคลีอิกได้ดีขึ้น

3 of 9

Outline

Step 1 : การทำให้เซลล์แตก (Cell Lysis)

Step 2 : การกำจัดสารปนเปื้อนต่าง ๆ เช่น โปรตีน โพลีแซคคาไรด์ และพวกเอนไซม์ (Removal)

Step 3 : การชะ DNA หรือ RNA ที่จับคอลัมน์หรือแม่เหล็กอยู่ให้กลับมา (Recovery)

การสกัดกรดนิวคลีอิกให้บริสุทธิ์ด้วยแม่เหล็ก

Magnetic nucleic acid purification

ขั้นตอนการสกัด แบ่งออกเป็น 3 ขั้นตอน ดังนี้

4 of 9

https://www.youtube.com/watch?v=ukZp6Adu534&t=34s

Preparation

5 of 9

https://www.youtube.com/watch?v=ukZp6Adu534&t=34s

Step 1

- Cell Lysis

- Lysis buffer

- Protease K

- Temperature

6 of 9

https://www.youtube.com/watch?v=ukZp6Adu534&t=34s

Step 2

- Removal

การกำจัดสารปนเปื้อนต่าง ๆ

- สารละลายเกลือ

- Alcohol

7 of 9

https://www.youtube.com/watch?v=ukZp6Adu534&t=34s

Step 3

- Recovery

การชะ DNA หรือ RNA

- buffer

8 of 9

Reference

- https://bioentist.com

Reference

- https://www.cytivalifesciences.com/en/us/news-center/magnetic-beads-a-simple-guide-10001

- https://www.youtube.com/watch?v=ukZp6Adu534&t=34s

- https://www.sepmag.eu/blog/magnetic-dna-purification-history-recent-developments

9 of 9

THANK

YOU

THANK

YOU