1 of 27

Современные подходы к поиску противовирусных средств

Ольга Ивановна Яровая

Новосибирский институт органической химии �им. Н.Н. Ворожцова СО РАН

2 of 27

Способы борьбы с вирусными заболевания человека

Предупреждение

Вакцинация

Специфическая противовирусная терапия

Предупреждение распространения вируса

Сопровождающая терапия

Лечение

3 of 27

Вирусы гриппа А, В

Коронавирусы

Вирус иммунодефицита� человека

Вирус клещевого энцефалита

Вирус Хантаан

Вирус простого герпеса

Вирус натуральной оспы

Вирус Эбола

Папилломавирусы

5 of 27

https://ru.khanacademy.org/

6 of 27

Nature Materials\VOL 19\August 2020\810–820

Стратегии поиска противовирусных агентов

Жизненный цикл вируса

Ингибиторы репликации

Ингибиторы входа вируса

7 of 27

Этапы поиска новых противовирусных агентов

In silico

In vitro

In vivo

Docking score

IC₅₀, CC₅₀, SI

Эффективность, безопасность

9 of 27

In silico

Общий вид белков слияния вирусов

I тип

II тип

III тип

11 of 27

In vitro

13 of 27

Скрининг in vitro противовирусной активности в отношении филовирусов – Марбург, Эбола

Псевдовирусы на основе ВВС образуются при заражении монослоя клеток, трансфицированных интересующим нас поверхностным белком, вирусом везикулярного стоматита со «своим» гликопротеином.

Репликационно-дефектный псевдовирус

требует лабораторных помещений, оборудованых по классам �биозащиты BSL-1, BSL-2.

«ПЕРЕОДЕВАНИЕ ПСЕВДОВИРУСА»

15 of 27

Выбор исходных объектов
Направления химических модификаций
Синтез библиотек соединений
Скрининг in vitro
Выбор хита
Проверка in vivo
Изучение механизма действия
Доклинические исследования
Подведение к клиническим испытаниям

16 of 27

Выбор исходных объектов.

Cinnamomum camphora

17 of 27

Направления химических модификаций

18 of 27

Синтез библиотек соединений

Eur. J. Med. Chem. 2015, 105, 263

19 of 27

2018 – 100 лет пандемии «испанки»��За три года пандемия охватила весь мир и унесла от 40 млн до 100 млн жизней, став самой смертоносной эпидемией в истории человечества.��«Испанкой» переболело свыше 500 миллионов человек — почти треть населения Земли.

20 of 27

Пандемии гриппа:��Азиатский грипп (штамм H2N2) �— в 1957—1958 годах погибло около 70 тыс. человек.��Гонконгский грипп (штамм H3N2) �— в 1968—1969 годах погибло около 34 тыс. человек.��Птичий грипп (штамм H5N1) �— в 2003—2008 годах погибло около 360 человек��Свиной грипп (штамм А/H1N1) — в 2009—2010 годах погибли более 2600 человек�

21 of 27

Скрининг in vitro противовирусной активности (H1N1)

22 of 27

Соединение - лидер

Синтез в одну стадию; реакция без растворителя; очистка вакуумной перегонкой;
Оптимизация синтеза методом полнофакторного эксперимента - выход 87%; чистота 99,5%; ее 98%
Стабильная, твердая субстанция
Частичная растворимость в воде� (10 мг/1 мл)
Лабораторный регламент
Синтезировано 3 кг субстанции

23 of 27

Камфецин – новый противовирусный препарат широкого спектра действия

A/Cal (H1N1)pdm09	5.1	500
A/PR (H1N1)	5.6	459
A/Aichi (H3N2)	19.4	131
A/mallard (H5N2)	16.9	151
B/Lee	77	33

24 of 27

Молекулярное моделирование противовирусной активности камфецина.

25 of 27

Селекция и изучение вирусных штаммов, резистентных к камфецину�

Virology, 2018, V. 524, 69-77

Камфецин-резистентные штаммы вируса гриппа были получены при помощи серийного пассирования вируса A/Puerto Rico/8/34 (H1N1) в присутствии нарастающих концентраций камфецина. Для комплексной оценки биологических свойств вируса гриппа, выработавшего устойчивость к камфецину, было проведено тестирование его патогенности на модели гриппозной инфекции у белых мышей. Патогенность вируса оценивали по динамике весовых показателей и гибели животных, а также по инфекционной активности вируса в ткани легких.

Как было показано в ходе вирусологических исследований, инфицирование животных исходным, камфецин-чувствительным (Cf-S) и пассированным в присутствии камфецина, камфецин-резистентным (Cf-R) вирусом приводило к принципиально разным типам патологического процесса. Так, при всех изученных дозах вируса отмечалось снижение веса животных, заражённых вирусом Cf-S, в то время как масса тела животных, инфицированных вирусом Cf-R, не менялась в ходе опыта. Иными словами, можно сказать, что даже при приобретении резистентности к камфецину, вирус перестает быть патогенным.