REPUBLIQUE DU MALI�Un Peuple – Un But – Une Foi

MINESTERE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUES 

UNIVERSITE DES SCIENCES DES TECHNIQUES ET DES TECHNOLOGIE DE BAMAKO

​

​

​

​

FACULTE DS SCIENCES ET TECHNIQUES(FST)

​

​

EXPOSE DE : Microbiologie Encadreurs : Prof Lassana B Traore

Groupe : VII Et Dr Yaya Bouaré

​

​

�L’OXYDASE�

Plan de travail :

Préface

I)- Introduction

II)- Principe

III)- Technique

​

I)- Introduction :�

La technique de l’oxydase est un test qui est à la base de l’identification des bactéries surtout des Gram -.

Le test consiste à mettre en évidence la capacité de la bactérie testée à oxyder la forme réduite incolore des dérivés méthylés du paraphénylène diamine, en leurs formes oxydées semi-quinonique rose violacées.

Le terme d’oxydase est d'autre part, réservé aux enzymes utilisant l'oxygène comme substrat mais en bactériologie, il faut donc comprendre le terme d'oxydase comme la présence d'une enzyme réagissant avec un dérivé méthylé du paraphénylène diamine.

​

II)- Principe :�

Ce test permet de mettre en évidence une enzyme : la phénylène diamine oxydase des bactéries à partir de leur culture en milieu gélosé. Cette enzyme est capable d’oxyder un réactif : le N diméthyl paraphénylène diamine.

Ce réactif est incolore et en présence de l’enzyme, il libère un composé rose-violacé, noircissant à l’air.

​

​

​

Phénylène diamine oxydase

Réactif Incolore Rose-Violacé

​

III)- Technique :

Le réactif peut se trouver sous deux formes :

• Soit en solution : sur une lame de verre, déposer un carré de papier filtre et l’imbiber d’une solution fraîchement préparée de réactif,
• Soit sous la forme d’un disque pré-imprégné par le réactif.

​

Le mode Opératoire :�

• Avec l’anse d’incubation, Prélevé sur un milieu nutritif une colonie ayant bien poussée et l’isolée
• Placer un disque non imprégné sur une lame à l’aide d’une pince flambée
• Déposer une goutte de réactif sur le disque non imprégné
• Avec une pipette pasteur prélevée une colonie et la déposé doucement sur le disque

​

NB :�

• Ne pas utiliser l’anse métallique pour prélever les bactéries (En effet le métal peut être recouvert d’un oxyde et donner un résultat faussement positif)
• Le milieu solide contenant les colonies ne doit pas contenir d’indicateur de PH ni Glucide
• L’observation doit se faire après 30s environ

​

Observation :�

Cet exposé vous a été présente par:

​

​

Moussa Diallo et Mohamed Maiga