1 of 11

Взаємодія між мікобактеріофагом D29 та моноцитарною клітинною лінією THP-1

1

Аспірантка ІІІ року навчання спеціальності

162 Біотехнології ті біоінженерія

Смальчук Д.С.,

к.б.н., доцент кафедри мікробіології, вірусології та біотехнології

Іваниця Т. В.,

д.б.н., доцент кафедри генетики та мікробіології UAB, Іспанія

Домінгез Х.

​

2 of 11

Передумови дослідження

2

​

​

Туберкулез (Україна)

  • Україна входить до числа 30 країн з найвищим тягарем туберкульозу у світі;
  • 16 000 нових випадків ТБ в Україні (2020);
  • 4 000 нових випадків МР ТБ, що становить третину всіх випадків МР ТБ в Європейському регіоні ВООЗ.

Туберкульоз (ВООЗ)

  • Туберкульоз є другою інфекційною причиною смертності після COVID-19;
  • У 2021 році у світі на туберкульоз захворіли 10,6 мільйона людей (1,6 мільйона людей померли);
  • Близько 4,4% усіх випадків туберкульозу - це МР ТБ.

МР ТБ залишається кризою громадського здоров'я та загрозою безпеці охорони здоров'я.

3 of 11

Мікобактеріофаги

3

​

​

  • Мікобактеріофаги - це віруси, які інфікують лише мікобактерії-хазяїнів;

​

  • Виділено близько 10 000 бактеріофагів (більше ніж 2000 секвеновано);

​

  • Всі мікобактеріофаги є хвостатими фагами з геномами длДНК;

​

  • Більшість мікобактеріофагів є літичними;

4 of 11

Чому саме фаготерапія?

4

​

​

  • Специфічність - фаги націлені лише на певну бактерію-хазяїна;

​

  • Швидкий розвиток - фаги можна виробляти відносно легко і недорого;

​

  • Низька токсичність - фаги, як правило, вважаються безпечними і мають низьку токсичність;

5 of 11

Матеріали та методи

5

Лінія моноцитарних клітин людини (THP-1),�3*105 клітин на лунку

Лінія макрофагів

PMA

15 ng/ml

D29, MOI 10

4 год., 1,2,3 дні

Кількість макрофагів

Кількість бляшкоутворюючих одиниць (БУО)

37o C, 5% CO2

37o C, 5% CO2

24 години

Внутрішньоклітинні

Супернатант

6 of 11

Матеріали та методи

6

Кількість макрофагів

Кількість бляшкоутворюючих одиниць (БУО)

Трипсін

RPMI+10%FBS

Камера Ньюбауєра

Лізування MQ водою

Розвдення до 10-11 ступіню

Метод двошарового агару

7 of 11

Результати та обговорення

7

8 of 11

Результати та обговорення

8

9 of 11

Результати та обговорення

9

10 of 11

Висновки

  • Досліджено можливість бактеріофагу потрапляти всередину клітин макрофагів;
  • Використання бактеріофагів не призводить до значної гибелі макрофагів;
  • Після потрапляння всередину клітини бактеріофаг починає руйнуватися, але зберігає біологічну активність;
  • Біологічна активність внутрішньоклітинних бактеріофагів була викликана наявністю хвостових відростків всередині макрофагів.

​

10

11 of 11

Дякую за увагу!

11