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INTRODUCTION ET PLACE DE L’ANATOMIE PATHOLOGIQUE EN MEDECINE

B Belbachir

EHUO

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Qu’est ce que l’Anatomie pathologique?

L’anatomie pathologique (ou pathologie) est une discipline médicale qui permet la reconnaissance des anomalies des cellules et des tissus d’un organisme. Ces anomalies sont appelées « lésions »

Elle nécessite une collaboration étroite entre le pathologiste et les autres intervenants : le radiologue, le clinicien, le chirurgien…(corrélation anatomo-clinique)

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Qu’est ce qu’une lésion?

Elle peut être la cause ou la conséquence d’un processus pathologique

Les lésions sont reconnues en utilisant des techniques principalement fondées sur la morphologie macroscopique et microscopique.

Celles-ci sont des signes de maladies, au même titre que les symptômes cliniques

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Qu’est ce qu’une lésion?

Les causes d’une lésion :

Anomalies génétiques

Agents infectieux

Agents chimiques

Agents physiques

Déséquilibres

    • circulatoires
    • nutritionnels
    • hormonaux
    • immunitaires…

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Le rôle de la pathologie

  • Élaboration d’un diagnostic
  • Évaluer l’effet des thérapeutiques
  • Préciser le pronostic

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Démarche diagnostique

Les différents types de prélèvements

Les techniques anatomopathologiques

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Prélèvements cytologiques

Consiste en une étude des cellules isolées obtenues

  • soit par frottis de l’organe à étudier (par exemple le frottis cervico-utérin dans le dépistage du cancer du col utérin)
  • soit par apposition d’un prélèvement,
  • soit par aspiration d’un orifice naturel (par exemple aspiration bronchique),
  • soit par ponction d’un liquide (pleural, péritonéal, liquide céphalo-rachidien...) ou d’une tumeur.

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Prélèvements tissulaires

Trois modalités:

    • Biopsie
    • Pièce opératoire
    • Autopsie

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La Biopsie

  • Prélèvement d’un fragment de tissu sur un être vivant en vue d’un examen anatomopathologique
  • Plusieurs modalités:

- par ponction: aiguille ou trocart

- par chirurgie:

biopsie d’incision

biopsie-exérèse

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La valeur de la biopsie

Dépend de:

    • La taille
    • La zone prélevée
    • Orientation tissulaire
    • La préservation de l’échantillon

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Pièce opératoire d’une oeso-gastrectomie

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Techniques d’étude des tissus

  • Fixation
  • Étude macroscopique
  • Préparation du tissu
  • Coupes et colorations

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Fixation

  • Indispensable pour conserver la morphologie cellulaire
  • Formol 10% solution aqueuse d’aldéhyde formique à 10%
  • Le liquide pénètre dans le tissu et permet une meilleure coloration histologique
  • Pour les tissus calcifiés
    • Solution décalcifiante (acide)

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Étude macroscopique

  • Partie essentielle de l’étude d’une pièce opératoire:
    • Examen
    • Mesure
    • Poids
    • Palpation
    • Dissection

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Étude macroscopique

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A. Surface tatouée à l’encre de chine. B. Tranche de section de la prostate : l’encre ne pénètre pas en

profondeur. En bas lors de l’examen microscopique, l’encre permet de repérer exactement les limites

de la résection chirurgicale (limite noire à gauche).

Pièce d’exérèse de prostate et de vésicules séminales

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Préparation du tissu

  • Les prélèvements une fois fixés et décrits sont déposés dans des cassettes de plastique
  • S’ensuit un processus de déshydratation par alcool
  • Élimination de l’alcool par des solvants (xylène)
  • Orientation du ou des fragments tissulaires
  • Paraffine liquide (enrobage du tissu)

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Inclusion manuelle du tissu dans un moule de paraffine

Orientation des prélèvements dans la paraffine liquide Refroidissement de la paraffine.

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Coupes et Coloration

  • Le bloc solide de paraffine contenant le tissu (A) est coupé par microtome (3 à 5 microns)
  • Le ruban obtenu est déposé sur une lame
  • Évaporation de la paraffine
  • Coloration (H&E: hématoxyline et éosine)

Microtome

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Coloration hématoxyline-éosine-safran d’une muqueuse de trompe utérine

La coupe colorée est protégée par une lamelle de verre collée, ou par un film plastique transparent.

Elle est alors prête à être analysée au microscope par un médecin anatomopathologiste.

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Techniques particulières en Pathologie

Examen histologique extemporané :

Il s'agit d'un examen anatomopathologique réalisé le plus souvent en cours d'intervention chirurgicale dans le but de fournir un résultat en général en moins de 30 minutes.

Le prélèvement doit être adressé immédiatement, à l'état frais, sans fixateur ni sérum physiologique.

il est effectué sur un tissu frais durci par congélation (-20°C environ) et coupé avec un microtome à congélation (microtome dans une enceinte réfrigérée) et coloration rapide de la coupe.

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Colorations histochimiques spéciales

Le but est de mettre en évidence des constituants particuliers des cellules (glycogène, mucus, pigments, etc.), ou de la matrice extra-cellulaire (collagènes, fibres élastiques, amylose, etc.), ainsi que des agents infectieux (bactéries, parasites, champignons).

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Immunohistochimie

L’immunohistochimie est très largement utilisée, consiste à mettre en évidence divers antigènes (Ag) cellulaires, ou extracellulaires, grâce à des anticorps (Ac) spécifiquement dirigés contre eux, permettant d’identifier la nature de la cellule.

Mise en évidence immunohistochimique de l’insuline dans un îlot de Langerhans sur tissu pancréatique fixé

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Immunofluoréscence

L’immunofluorescence directe est surtout utilisée pour mettre en évidence les dépôts tissulaires d’immunoglobulines et de complément dans les biopsies cutanées et dans les biopsies rénales congelées, observées grâce à un microscope à fluorescence

Immunofluorescence sur une biopsie rénale congelée

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Hybridation in situ

Le principe de cette technique est d'identifier une séquence d'acide nucléique, ARN ou ADN,

présent dans des cellules d'une préparation histologique ou cytologique.

Les sondes nucléiques sont couplées à des traceurs, fluorochrome (fluorescence in situ hybridization, FISH) ou enzyme (chromogenic in situ hybridization, CISH). La visualisation au microscope de l'acide nucléique recherché, auquel s'est fixée la sonde.

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Sur la feuille de demande d’examen anatomopathologique doivent figurer

les identifiants du patient

• l’adresse du patient et/ou du service de consultation ou d’hospitalisation

• le nom du médecin préleveur et ses coordonnées • le caractère urgent éventuel de la demande

• la nature du prélèvement

• le siège du ou des échantillons

• la date et l’heure du prélèvement

• les renseignements cliniques pertinents

• les recherches particulières demandées

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Déontologie et aspects législatifs

Le compte-rendu anatomocytopathologique est daté et signé par le médecin habilité qui a effectué l’examen et est adressé au médecin prescripteur de l’examen,

Le compte-rendu devient un élément du dossier médical du patient et est couvert par le secret médical.

L’avis d’autres médecins anatomopathologistes peut être sollicité dans diverses circonstances.

Les résidus de pièces opératoires ou de prélèvements nécropsiques sont détruits après l’analyse anatomopathologique mais les blocs d’inclusion, les lames colorées et les comptes-rendus sont conservés par le laboratoire dans des archives : il s’agit d’une obligation légale