Д.А. Бирюкова, А.А. Гависова, П.О. Пацкова, А.И Бердникова, В.В.Чаговец
ФГБУ «НАЦИОНАЛЬНЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ЦЕНТР АКУШЕРСТВА, ГИНЕКОЛОГИИ
И ПЕРИНАТОЛОГИИ ИМЕНИ АКАДЕМИКА В.И. КУЛАКОВА» МИНИСТЕРСТВА ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РФ
АМИНОКИСЛОТЫ И МЕЛАТОНИН У ПАЦИЕНТОК С МНОЖЕСТВЕННЫМИ БЕЗУСПЕШНЫМИ ПРОГРАММАМИ ВРТ В АНАМНЕЗЕ
ВВЕДЕНИЕ.
Несмотря на технологический прогресс и колоссальный опыт в клинической практике врачи-репродуктологи все чаще сталкиваются с отсутствием эффекта от проводимого лечения. Термин «неэффективные программы ВРТ» в профессиональном сообществе принято идентифицируется преимущественно с повторными имплантационными неудачами (recurrent implantation failure, RIF), однако данное понятие включает в себя более широкий симптомокомплекс, часто ассоциировано с поздним репродуктивным возрастом и снижением овариального резерва. Эндокринно-метаболомный профиль сыворотки крови и фолликулярной жидкости может отражать изменения в репродуктивной системе, происходящие на молекулярном уровне, и дать ответы на актуальные вопросы о причинах отсутствия эффекта от проводимого лечения у данной когорты пациенток.
ЦЕЛЬ.
Провести анализ эндокринно-метаболомного профиля у пациенток с множественными неэффективными программами ЭКО/ИКСИ в анамнезе, а также определить эффективность применения перорального мелатонина у данной группы с целью улучшения исходов программ ВРТ.
РЕЗУЛЬТАТЫ.
У женщин 1-й группы было выявлено снижение относительного содержания фенилаланина, триптофана, мелатонина, 6-OH-мелатонина и повышение глицина, глютамина и глютаминовой кислоты (глютамат) в периферической крови в сравнении с группой контроля. В фолликулярной жидкости пациенток 1-й группы было установлено низкое относительное содержание фенилаланина, глютамина, глютаминовой кислоты, триптофана, мелатонина и 6-ОН-мелатонина, а также повышение глицина, что не было характерно для доноров ооцитов (4-я группа). В ходе сравнительного анализа клинических параметров и эндокринно-метаболомного профиля сыворотки крови были выявлены умеренные отрицательные корреляционные связи между общим числом полученных ооцитов в программе ВРТ, частотой наступления беременности и уровнем глютамина, глютаминовой кислоты и фенилаланина. Также были обнаружены умеренные положительные корреляционные связи между уровнем мелатонина в сыворотке крови и общим числом полученных ооцитов, а также уровнем 6-OH-мелатонина и частотой наступления беременности. При сравнительном корреляционном анализе эндокринно-метаболомного профиля фолликулярной жидкости и клинических параметров были отмечены умеренные отрицательные корреляционные связи между уровнем глицина и показателями оогенеза и раннего эмбриогенеза, а также умеренные положительные связи между фенилаланином, общим числом зрелых ооцитов, полученных и криоконсервированных бластоцист. Установлены сильные положительные корреляционные связи между уровнем триптофана и мелатонина в фолликулярной жидкости и параметрами оогенеза, раннего эмбриогенеза и частотой наступления беременности.
ВЫВОДЫ.
У пациенток с множественными неэффективными протоколами ЭКО/ИКСИ описанные отличия уровней аминокислот и мелатонина в крови и ФЖ могут свидетельствовать об особенностях фолликулогенеза и раннего эмбриогенеза, которые связаны в том числе с нарушением антиоксидантной системы, а также о влиянии приема мелатонина на пути, связанные с метаболизмом аминокислот. На основе полученных данных можно сделать вывод о перспективности внедрения мелатонина в качестве прегравидарной подготовки у пациенток с множественными неэффективными циклами ВРТ в анамнезе с целью повышения их результативности. Исходя из вышеизложенного можно предположить необходимость пересмотра состава культуральных сред в виду изменения клинического портрета пациенток с репродуктивными неудачами, для которых характерна остановка эмбрионального развития, отсутствие бластоцист хорошего и отличного качества, ввиду чего в будущем было бы целесообразно рассмотреть возможность обогащения культуральных сред аминокислотами, непосредственно вовлеченными в метаболизм оо- фолликулогенеза, с целью повышения эффективности программ ВРТ.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.
В исследование были включены 100 пациенток в возрасте от 25 до 40 лет, обратившихся в ФГБУ ≪НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова≫ МЗ РФ с целью лечения бесплодия. Забор ооцитов осуществлялся в программе ЭКО в стимулированном или естественном цикле. Пациентки были стратифицированы на 4 группы: 1-я группа – 37 женщин с множественными неэффективными программами ВРТ в анамнезе с АМГ<1,2 нг/мл, КАФ<5; 2-я группа – 18 женщин с множественными неэффективными программами ВРТ в анамнезе с АМГ≥1,2 нг/мл, КАФ≥5; 3-я группа (лечебная) – 18 пациенток с множественными неэффективными программами ВРТ в анамнезе, получавших дневную дозу мелатонина 3 мг на протяжении месяца до вступления в протокол ВРТ, с АМГ<1,2 нг/мл, КАФ<5; 4-я группа (контроля) – 27 доноров ооцитов с АМГ≥1,2 нг/мл, КАФ≥5. У всех пациенток был произведен забор периферической крови на 2–3-й день менструального цикла до вступления в программу ВРТ и фолликулярной жидкости в день трансвагинальной пункции яичников. В полученных образцах был проанализирован профиль аминокислот, мелатонина и 6-OH-мелатонина методом жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием (ЖХ-МС). Для оценки эффективности применения мелатонина проводили анализ общего количества ооцитов, количества зрелых ооцитов (MII), количества зигот (2PN), процента фертилизации, количества полученных и криоконсервированных бластоцист, частоты наступления беременности в группах 1 и 3.