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TOMA DE MUESTRAS PARA ESTUDIOS MICROBIOLÓGICOS

Dr. Armando Guevara P.

Complejo Hospitalario “Ruiz y Páez”

Unidad de Infectología y Microbiología Médica

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PROPÓSITO DEL LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA

  • Aislamiento del agente causal.
  • Identificación del microorganismo.
  • Susceptibilidad a determinados antimicrobianos.

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CONDICIONES PARA REALIZAR UN ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO

  • Oportuna.
  • Antes de usar antimicrobianos
  • Representativa del proceso infeccioso.
  • Material a usar debe ser estéril.
  • Cantidad suficiente para.....
  • Usar medios de transporte adecuados
  • Envío rápido al laboratorio

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SOLICITUD DE EXÁMEN MICROBIOLÓGICO

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No. de muestra ___________

No. de historia ____________ Servicio _________________ Fecha __________________

Complejo Hospitalario “Ruiz y Páez”

Ciudad Bolívar -Venezuela

Nombre:_____________________________ Edad: _____ Sexo: _____

Telf: _________ Ocupación: __________ Medico solicitante: ______

Dirección Actual:_____________________________________________

Dx. presuntivo: ______________________________________________

Tto. anterior y/o actual: ________________________________________

Antecedentes epidemiológicos: _________________________________

Datos Clinicos Breves:_________________________________________

Tipo de Muestra: _____________________________________________

Tipo de Examen Solicitado:

Gram Cultivo para bacterias de crecimieto rapido Otros_________

Baciloscopia Cultivo de micobacterias Tinciones y Cultivo para hongos

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RECOLECCIÓN DE LA MUESTRA

Por hisopado

Por punción - aspiración

Por aspiración con sonda

En envases

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Muestras de lesiones cerradas�(obtenidas por punción)

  • Líquidos naturalmente estériles
  • Secreción de:

Abscesos cerrados

Ganglios linfáticos fluctuantes

Nódulos fluctuantes

  • Erisipela
  • Celulitis no abscedada
  • Otras

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RECOLECCIÓN DE LA MUESTRA�(muestras por punción)

  • Preparación del sitio

Solución yodada 1 minuto

Alcohol al 70% 1 minuto

Paciente alérgico al yodo:

Alcohol al 70% 2 ó 3 veces

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RECOLECCIÓN DE LA MUESTRA�(muestras por punción)

  • Realizar la punción a través de piel sana

  • En celulitis y erisipela:

Si no se obtiene muestra inyectar 0,5 a 1 ml de solución fisiológica y luego aspirar

  • Muestras de líquido articular:

usar jeringa heparinizada

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Muestras de lesiones abiertas

Infecciones agudas

  • Infección de herida quirúrgica
  • Infección de herida traumática
  • Infección de quemaduras
  • Infección de mordeduras

Infecciones crónicas

  • Úlceras de decúbito o por presión
  • Úlceras vasculares
  • Infección de pie diabético

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Muestras de lesiones abiertas

Preparación de área:

  • Eliminar medicamentos tópicos
  • Eliminar tejido necrótico y desvitalizado
  • Lavar bien con solución fisiológica
  • Tomar muestra de tejidos viables infectados

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Muestras de lesiones abiertas

Toma de muestra para infección aguda:

Con Hisopo

  • Frotar con hisopo área de 1 cm2
  • Evitar sangrado
  • Heridas secas: humedecer hisopo con Sol. Fis.

Biopsia de tejido

  • Debe tomarse del fondo de la lesión

Secreción purulenta

  • aspirar con jeringa de parte mas profunda de herida

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Muestras de lesiones abiertas

Toma de muestra para infección aguda:

(Infecciones de quemaduras)

Con Hisopo

  • Frotar con hisopo área de 1 cm2
  • Heridas secas: humedecer hisopo con Sol. Fis.

Biopsia

  • Con “Punch”
  • Insicional

Limpiar superficie de quemadura con alcohol al 70%

Realizar 2 incisiones paralelas de 1 ó 2 cm. de longitud, separadas por 1,5 cm.

Obtener muestra profunda de tejido viable con bisturí y pinza estéril

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Muestras de lesiones abiertas

Toma de muestra para infección crónica:

(Úlceras de decúbito o por presión y vasculares)

Aspiración percutánea

  • A través de piel sana periulceral
  • En zona de ulcera con tejido de granulación o ausencia de esfacelos
  • Punción–aspiración manteniendo jeringa inclinada 45º aprox. hasta llegar a pared de lesión
  • En infecciones no supuradas inyectar Sol. Fis.

Biopsia de tejido

  • Debe tomarse de zonas con signos de infección

Con Hisopo

  • Frotar con hisopo áreas sugestivas de infección
  • Heridas secas: humedecer hisopo con Sol. Fis.

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Muestras de lesiones abiertas

Toma de muestra para infección crónica:

(Infecciones de pie diabético)

Biopsia de tejido

  • Debe tomarse del fondo de la lesión

Secreción purulenta

  • aspirar con jeringa de parte mas profunda de herida

No se recomienda uso de hisopos

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TRANSPORTE Y CONSERVACIÓN

Muestras obtenidas por punción:

  • Enviar en jeringa o tubo estéril

Muestras obtenidas con hisopos:

  • Colocar en medio de transporte
  • Temperatura ambiente

Todas deben ser procesadas inmediatamente , pero......

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No invente. Si extrajo la muestra con jeringa, envíela al laboratorio en la misma jeringa

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TRANSPORTE Y CONSERVACIÓN

En casos excepcionales

  • Colocar secreciones o LCR en caldo BHI (frascos de hemocultivo)
  • LCR 1 ml Frasco pequeño
  • Otros 10 ml Frasco grande
  • Mantener a temp. ambiente o en estufa

No use tubos con

tapa roja

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TRANSPORTE Y CONSERVACIÓN

Biopsias:

  • Colocar en envase estéril con gotas de solución fisiológica
  • Enviar inmediatamente al laboratorio

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Osteomielitis

  • Limpieza de piel y/o tejidos blandos subyacentes a la lesión.

  • Tomar muestra por punción-aspiración, biopsia con trocar

Los microorganismos recuperados de muestras

de trayectos fistulosos no representan la verdadera

etiología de la osteomielitis

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ORINA

Toma de la muestra

  • Orina del chorro medio

(micción espontánea)

  • Sondaje vesical
  • Punción suprapúbica

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ORINA

Orina del chorro medio

  • Envase estéril con tapa de rosca
  • Primera orina de la mañana
  • Lavar genitales con agua y jabon. No secarse.
  • Desechar el primer chorro de orina sin parar la miccion.
  • Mujer: separar labios.
  • Evitar contacto con la piel.

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ORINA

Pacientes que no controlan esfinteres

  • Bolsa recolectora estéril
  • Lavar genitales con agua y jabon.
  • Cambiar cada hora

Pacientes con sonda uretral

  • Cambiar sonda
  • Tomar orina del extremo libre o pinzar sonda por

2 horas y luego aspirar con jeringa y aguja

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ORINA

Punción suprapúbica

  • Jeringa y aguja
  • Extracción directa de vejiga

Conservación y transporte

  • Enviar inmediatamente al laboratorio
  • Refrigerar la orina hasta llevar al laboratorio.
  • Llevar al laboratorio en envase con hielo

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HEMOCULTIVO

Indicaciones:

  • Fiebre de origen desconocido
  • Síndrome febril agudo
  • Endocarditis bacteriana
  • Sepsis

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HEMOCULTIVO

Cuando tomar las muestras

  • Antes de iniciar antibióticoterapia
  • Antes de la próxima dosis de antibiótico
  • Antes del pico febril

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HEMOCULTIVO

Número de muestras

Por lo menos 1 serie (2 ó 3 frascos)

Cantidad de sangre

10 ml de sangre c/u

Intervalo entre frascos

Cada muestra debe tomarse con 40 minutos de intervalo

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HEMOCULTIVO

¿Por qué 10 ml de sangre?

  • Mientras más sangre, más posibilidad de aislamiento. Relación 1:10

¿Por qué con 40 minutos de diferencia?

  • Para diferenciar sepsis de bacteriemias intermitentes

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PUNTA DE CATETER

  • Sólo para catéteres vasculares, derivación ventricular, cateter bilumen.
  • NO PARA SONDA DE FOLEY
  • Enviar sólo 5 cm distales
  • Colocar en tubo estéril seco con tapa (pedirlo al laboratorio)

No use tubos con

tapa roja

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EXUDADO FARINGEO

Preparación del paciente

  • Sin cepillado dental
  • En ayunas

Transporte y conservación

  • Colocar en medio de transporte
  • Temperatura ambiente

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ESPUTO

Investigar dos tipos de enfermedades:

  • Tuberculosis
  • Neumonía

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ESPUTO: Investigación de Tuberculosis

  • Recolección en envase estéril o no estéril
  • Esputo, no saliva
  • Preferiblemente en la mañana al levantarse.
  • Antes del cepillado de dientes
  • En un lugar ventilado

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ESPUTO: Investigación de neumonía

  • Recolección en envase estéril
  • Esputo, no saliva
  • Cepillado dental
  • Enjuague bucal

CELULAS EPITELIALES

LEUCOCITOS PMN

Grupo 1

>25

<10

Grupo 2

>25

10 – 25

Grupo 3

>25

>25

Grupo 4

10 – 25

>25

Grupo 5

<10

>25

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ESPUTO

Técnicas opcionales

  • Drenaje postural
  • Aspiración con catéter
  • Inducción por nebulización con sol. fisiológica
  • Aspiración transtraqueal percutánea

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SOLUCIONES A ALGUNOS PROBLEMAS

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LIQUIDOS ORGÁNICOS�Pleural, ascítico, pericárdico, articular

Muestras nocturnas o fin de semana:

  • Inocular 10 ml en frasco de hemocultivo.
  • Colocar en estufa a 35 – 37º C

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SECRECIÓN PURULENTA TOMADA CON HISOPO

Muestras nocturnas

  • Colocar hisopo en medio de transporte.
  • Colocar a tempertura ambiente

No hacerlo fines de semana

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CRITERIOS DE RECHAZO

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CRITERIOS DE RECHAZO

  • Petitorio incompleto
  • Discrepancia entre identificación del paciente, solicitud del examen y tipo de muestra.
  • No indica tipo de muestra y/o exámen deseado.
  • Muestra identificada solo por sitio anatómico (brazo, pierna)
  • Saliva (cultivo de esputo).

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CRITERIOS DE RECHAZO

  • Gram: exudado faríngeo, heces, sec. Nasal, punta de cateter, y muestras en medio de transporte (cary-blair) y no ssf..
  • Orinas en envases no adecuados, y con mas de 1 hora a temperatura ambiente.
  • Recipientes inadecuados (esputo para cultivo en envases de heces o envases de BK)

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CRITERIOS DE RECHAZO

  • Sondas de Foley.
  • LCR en tubos con tapa de algodón.
  • Muestras derramadas.
  • Cultivos para anaerobios en medios convencionales.

“TODA MUESTRA QUE NO ESTÉ BIEN IDENTIFICADA Y SIN INFORMACIÓN CLÍNICA”

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La calidad del trabajo de laboratorio no puede ser superior a la calidad de la muestra recibida