1 of 1

Авторы: А.А. Селиверстова², А.С. Якимова¹, Н.П. Макарова¹, Е.А. Калинина¹

Учреждения:¹ФГБУ НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова Министерства здравоохранения России

²ФГАОУ ВО «Российский университет дружбы народов имени Патриса Лумумбы»

�

Учреждение (Arial 36 - 44 pt) можно добавить логотип учреждения

ВЛИЯНИЕ СЕЛЕКЦИИ НА МИКРОФЛЮИДНОМ ЧИПЕ SPRINT НА УРОВЕНЬ ОКИСЛИТЕЛЬНОГО СТРЕССА СПЕРМАТОЗОИДОВ: ОЦЕНКА МЕТОДОМ ПРОТОЧНОЙ ЦИТОМЕТРИИ (SPERM-CYTO).

РИСУНОК 1.

Дизайн исследования

РИСУНОК 2.

Распределение значений уровня АФК(%) в зависимости от метода обработки

ЦЕЛЬ.

Проведение сравнительного анализа уровня АФК в сперматозоидах из нативного эякулята, после центрифугирования в градиенте плотности и микрофлюидной селекции SPRINT с использованием проточного цитометра Sperm-Cyto.

ВЫВОДЫ.

Лабораторная обработка эякулята сопровождается статистически значимым повышением уровня АФК в сперматозоидах по сравнению с нативными образцами, независимо от применяемого метода селекции.
Одним из ключевых факторов является удаление семенной плазмы, которая в норме обеспечивает антиоксидантную защиту. Кроме того, усиливать продукцию АФК может механическое напряжение, возникающее при центрифугировании, и длительное нахождение в «искусственной» среде.
Перспективным направлением оптимизации пробоподготовки эякулята является разработка физиологичных, биомиметических культуральных сред и щадящих технологий селекции сперматозоидов, направленных на минимизацию оксидативного стресса и сохранение функционального потенциала мужских гамет

РЕЗУЛЬТАТЫ.

Средняя доля живых сперматозоидов с повышенным уровнем АФК составила:

48,70±17,2% – нативный эякулят
77,95±11,9% – после центрифугирования в градиенте плотности
72,85±15,5% – после микрофлюидной селекции

Однофакторный дисперсионный анализ выявил статистически значимые различия между группами (p<0,001).

Доля живых сперматозоидов с повышенным уровнем АФК в нативных образцах была статистически значимо ниже по сравнению с образцами после центрифугирования и микрофлюидной селекции (p<0,001).

Различий между градиентом плотности и SPRINT не выявлено (p=0,33).

Корреляция между возрастом пациента и долей живых сперматозоидов с повышенным уровнем АФК во всех группах была слабой и статистически незначимой (r=−0,12; −0,11; −0,05; p>0,05).

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

Проведен сравнительный анализ уровня активных форм кислорода (АФК) в образцах эякулята 20 мужчин репродуктивного возраста (средний возраст 36 лет). Критерием включения считали концентрацию сперматозоидов >16 млн/мл.

Каждый образец делили на три группы:

1. Нативный эякулят�2. Центрифугирование в градиенте плотности�3. Микрофлюидная селекция на чипе SPRINT

Долю живых сперматозоидов с повышенным уровнем АФК определяли методом проточной цитометрии Sperm-Cyto. Для каждого образца анализировали ≥5000 сперматозоидов.

Статистический анализ проводили в RStudio 2025.09.2. Связь возраста пациента с уровнем АФК оценивали с помощью корреляции Пирсона. Различия между группами – методом однофакторного дисперсионного анализа с последующими попарными сравнениями с поправкой Бонферрони. p<0,05 считали статистически значимым.

ВВЕДЕНИЕ.

Повышение уровня активных форм кислорода (АФК) в эякуляте при недостаточности антиоксидантной защиты негативно влияет на функционирование сперматозоидов и может приводить к неудачам программ ВРТ. В процессе обработки изменяется микроокружение сперматозоидов и удаляется естественная антиоксидантная защита семенной плазмы, что может способствовать развитию окислительного стресса. В связи с этим актуально изучение влияния обработки эякулята, в частности селекции на отечественном микрофлюидном чипе SPRINT, на продукцию АФК.